Авторефераты» Фармацевтические науки » Технология лекарств и организация фармацевтического дела » Разработка состава и технологии настойки на основе растительного сырья для лечения атеросклероза

Разработка состава и технологии настойки на основе растительного сырья для лечения атеросклероза

Трутаев С.И. Разработка состава и технологии настойки на основе растительного сырья для лечения атеросклероза. – Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 15.00.01. – «Технология лекарств и организация фармацевтического дела» – Национальный фармацевтический университет, Харьков, 2010.

Проанализированы литературные данные относительно проблемы заболеваемости атеросклерозом, современное состояние фармацевтического рынка Украины препаратов антиатеросклеротического действия, перспективы использования лекарственного растительного сырья в терапии указанной патологии. Определена целесообразность применения ЛРС для создания нового отечественного препарата гиполипидемического действия в форме настойки.

Впервые теоретически и экспериментально обоснован состав и рациональная технология нового лекарственного препарата в форме настойки с гиполипидемической активностью, который содержит в качестве действующих веществ спиртовое извлечение семи видов лекарственного растительного сырья (побеги и листья омелы белой, трава хвоща полевого, плоды софоры японской, семена каштана конского, плоды боярышника кроваво-красного, цветы клевера полевого, трава барвинка малого).

Обоснована концепция исследований, которая учитывает особенности подхода к подбору рационального состава, технологии и позволяет получить эффективное, безопасное и доступное лекарственное средство с гиполипидемическим действием в виде настойки.

На основе экспериментальных технологических, химических, физико-химических, фармакологических данных разработан рациональный состав  настойки (побеги и листья омелы белой – 15,0, трава хвоща полевого – 10,0, плоды софоры японской – 15,0, семена каштана конского – 15,0, плоды боярышника кроваво-красного – 20,0, цветы клевера полевого – 10,0, трава барвинка малого – 15,0, этанола 40 % достаточное количество для получения 1 литра настойки). Выбраны оптимальные условия для экстрагирования (концентрация этанола, соотношение сырье : экстрагент, время настаивания). На основании полученных данных разработана рациональная технология производства настойки «Рависол» в заводских условиях.

Разработаны методики качественного и количественного определения действующих веществ в настойке. Исследованы показатели качества лекарственного средства «Рависол» с помощью физических, химических, физико-химических и микробиологических методов анализа. Проведена идентификация и подтверждено наличие основных групп биологически активных веществ (флавоноидов, полифенольных соединений, катехинов, сапонинов) с помощью цветных и осадочных реакций, а также методами тонкослойной хроматографии доказано наличие в настойке рутина, кверцетина, кемпферола, эсцина, кислоты урсоловой. С помощью спектрофотометрического метода, проведено количественное определение суммы флавоноидов с перерасчетом на рутин. Содержание полифенольных соединений определяли методом перманганатометрии с перерасчетом на танин. При стандартизации настойки «Рависол» появляется проблема ограничения вискотоксинов.  Поскольку эта молекула образована цепочками аминокислот (молекул, которые содержат аминогруппу), предлагается нормирование содержания общего азота.

На основании полученных данных разработаны и апробированы в промышленных условиях проекты методик контроля качества и технологического регламента на настойку «Рависол».

Изучена стабильность разработанного лекарственного средства на протяжении 27 месяцев и установлен срок хранения – 2 года во флаконах из темного стекла в сухом, темном месте при комнатной температуре.

Фармакологическими исследованиями доказаны антиатерогенное, гиполипидемическое, умеренное гипотензивное, слабое кардиотоническое и диуретическое действие, уменьшение свертываемости крови.

Внедрены технологический регламент и методы контроля качества в промышленное производство.

Настойка «Рависол» выпускается на ОАО «ХФЗ «Красная звезда»
г. Харьков (приказ Министерства здравоохранения Украины № 379 от 02.06.09; регистрационное удостоверение № UA/9617/01/01).

Научная новизна исследований защищена патентом Украины «Фармацевтична, лікувально-профілактична композиція на основі рослинної сировини» (№ 44193 від 25.09.2009), Бюл. № 18.

Издано информационное письмо «Методика определения суммы флавоноидов в настойках с ЛРС в условиях аптек» (Киев: Укрмедпатентин-форм МЗ Украины № 255 – 2009 г. – 4 с.), которое внедрено в работу аптек
№ 9 (акт внедрения от 10.12.2009) и № 308 (акт внедрения от 21.12.2009).

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ УКРАИНЫ

Национальный фармацевтический университет

Трутаев Сергей Игоревич

УДК: 615.451.16:615.32:615.014.24:616.13-004.6

РАЗРАБОТКА СОСТАВА И ТЕХНОЛОГИИ
НАСТОЙКИ на основе растительного сырья
для лечения атеросклероза

15.00.01 — технология лекарств и организация фармацевтического дела

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата фармацевтических наук

Харьков — 2010
Актуальность темы.
Работа выполнена на кафедре аптечной технологии лекарств Национального фармацевтического университета Министерства здравоохранения Украины,
г. Харьков.

Научный руководитель: заслуженный деятель науки и техники Украины,
академик Украинской академии наук,
доктор фармацевтических наук, профессорТИХОНОВ АЛЕКСАНДР ИВАНОВИЧ,

Национальный фармацевтический университет,

заведующий кафедрой аптечной технологии лекарств.

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор

ДЕМЬЯНЕНКО ВИКТОР ГРИГОРЬЕВИЧ,

Национальный фармацевтический университет,
заведующий кафедрой товароведения;

доктор фармацевтических наук, профессор

МАЗУЛИН Александр Владленович,

ФПО Запорожского государственного
медицинского университета,

заведующий кафедры фармакогнозии,
фармацевтической химии и технологии лекарств.

Защита состоится 01.07.2010 года в 13 часов на заседании диссертационного совета Д 64.605.02. при Национальном фармацевтическом университете по адресу: 61002, г. Харьков, ул. Пушкинская, 53.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Национального фармацевтического университета (61168, г. Харьков, ул. Блюхера, 4).

Автореферат разослан 30.05. 2010 года.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор фармацевтических наук, профессор Д.И. Дмитриевский

Общая характеристика работы
Актуальность темы.Сердечно-сосудистые заболевания продолжают оставаться основной причиной смертности как во всем мире, так и в Украине. Сегодня большое значение уделяют терапии, которая направлена на предупреждение осложнений, связанных с атеросклерозом и его последствиями: инфарктом миокарда и инсультом. Эти болезни занимают первое место как причина потери трудоспособности, инвалидности, смертности, они опережают онкологические, инфекционные заболевания, травмы и другие патологии.

В последние годы атеросклероз все чаще поражает людей молодого возраста. Если в 50 — 60-х годах прошлого века ишемия миокарда (ИМ) у мужчин в возрасте 40 — 50 лет встречалась довольно редко, то сейчас это стало обыденным явлением. Кроме того, сейчас ИМ в возрасте 30 — 40 лет у сильного пола даже не вызывает удивления, а из 100 мужчин, умерших в этом возрасте, около 15 погибают от ИМ и, кроме того, в 30 — 40% из них он является повторным.

В лечении атеросклероза высокую гиполипидемическое активность проявляют статины, которые избирательно подавляют синтез холестерина в печени. Их назначают для лечения этой болезни в большинстве стран мира и этот показатель ежегодно растет на 16 — 20%. Однако наряду с высокой фармакологической активностью эти средства являются почти недоступными для большинства населения нашего государства из-за того, что они почти все зарубежного производства, имеют достаточно высокую цену и, кроме того, проявляют нежелательные побочные эффекты.

В литературных источниках имеются данные об использовании для профилактики и лечения атеросклероза лекарственного растительного сырья (ЛРС), действие которой определяется содержанием в ней биологически активных веществ (БАВ): флавоноидов, фосфолипидов, стероидных сапонинов, витаминов, микроэлементов, аминокислот, гормоноподобных веществ, ферментов и др.. Активные антиатерогенными ингредиенты ЛРС содержатся в ней в низких концентрациях, за счет этого фармакологическое действие проявляется постепенно. Невысокое содержание БАВ, низкая общая токсичность растений позволяет снизить риск появления побочных эффектов, что позволяет длительно и безопасно применять такой препарат без осложнений.

В связи с этим разработка состава и технологии растительного препарата в форме настойки для лечения атеросклероза является актуальной.

Связь работы с научными программами, планами, темами.Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Национального фармацевтического университета («Технология получения оригинальных и комбинированных фармацевтических средств в различных лекарственных формах», № государственной регистрации 0108U009174) и проблемной комиссии «Фармация »МЗ и АМН Украины (протокол № 41 от 19.04.2006).

Цель и задачи исследования.Целью работы является теоретическое и экспериментальное обоснование состава и технологии настойки на основе лекарственного растительного сырья для фармакотерапии атеросклероза.

Реализация поставленной цели потребовала решения следующих задач:

  • проанализировать и обобщить современные данные литературы по лечению атеросклероза
  • провести анализ современного ассортимента рынке Украины лекарственных препаратов гиполипидемического действия;
  • разработать состав и технологию сложной настойки;
  • изучить качественный и количественный содержание биологически активных веществ, установить срок, условия хранения и стабильность настойки;
  • разработать методы контроля качества (АНД) и технологический промышленный регламент на новое лекарственное средство;
  • провести доклинические фармакологические, клинические и микробиологические исследования разработанной настойки с целью внедрения в медицинскую практику;
  • зарегистрировать в Минздраве Украины и внедрить настойку в промышленное производство на ОАО «ХФЗ« Красная звезда »(г. Харьков).

Объект исследования:  лекарственное растительное сырье: побеги и листья омелы белой, трава хвоща полевого, плоды софоры японской, семена каштана конского обыкновенного, плоды боярышника кроваво-красного, цветки клевера лугового, трава барвинка малого; настойки каждой ЛРС, лекарственное средство в форме настойки под условным названием «Рависол».

Предмет исследования:  анализ литературных источников, разработка оптимального состава и рациональной технологии настойки на основе ЛРС для профилактики и лечения атеросклероза, изучение качественного и количественного содержания биологически активных веществ в ее составе, разработка методов контроля качества, установление срока годности настойки, разработка технологического промышленного регламента, необходимого для внедрения ее в производство.

Методы исследования для решения поставленных в работе задач были использованы общепринятые органолептические, технологические, физические, физико-химические, химические, микробиологические и фармакологические методы исследований, позволяющие объективно оценивать качественные и количественные характеристики растительного сырья, а также полученных экстракционных препаратов на основании экспериментально полученных и статистически обработанных результатов.

Научная новизна полученных результатов.Впервые теоретически и экспериментально обоснованы состав и технологию нового лекарственного средства с гиполипидемическими свойствами на основе биологически активных веществ лекарственного растительного сырья под условным названием «Рависол».

Качественными реакциями и методами тонкослойной хроматографии в настойке «Рависол» установлено наличие групп и отдельных биологически активных веществ, которые положительно влияют на состояние лечения при атеросклерозе.

С использованием современных методов анализа предложено реакции идентификации и количественного определения содержания основных действующих веществ разработанного лекарственного средства, установлены условия и срок его хранения, а также разработаны методики контроля качества.

Установлено, что разработанная настойка «Рависол» по своим фармакологическим свойствам сочетает в себе антиатерогенное,гиполипидемическое, умеренную гипотензивное, слабую кардиотоническое и диуретическое действия, замедляет свертывание крови.

Научная новизна исследований защищена патентом Украины «Фармацевтическая, лечебно-профилактическая композиция на основе растительного сырья» (№ 44193 от 25.09.2009, Бюл. № 18, с.20).

Практическое значение полученных результатов.Создан новый оригинальный отечественный препарат с гиполипидемическим действием в форме настойки на основе лекарственного растительного сырья.

Проведено доклинические фармакологические, клинические и микробиологические исследования нового лекарственного средства под условным названием «Рависол».

Разработан и внедрен в промышленное производство методики контроля качества и технологический промышленный регламент на настойку «Рависол», выпускаемой на ОАО «ХФЗ« Красная звезда », г. Харьков (приказ МЗ Украины № 379 от 02.06.09; регистрационное удостоверение
№ UA/9617 / 01/01).

Разработан и утвержден Украинским центром научной медицинской информации и патентно-лицензионной работы МЗ Украины информационное письмо «Методика определения суммы флавоноидов в настойках из лекарственного растительного сырья в условиях аптек» № 255 — 2009 г. (протокол № 59 от 21.10.2009), который внедрен в работу ООО «Аптека» № 9 (акт внедрения от 10.12.2009), аптека № 308 (акт внедрения от 21.12.2009).

Фрагменты работы внедрены в учебный процесс кафедры промышленной фармации Национального фармацевтического университета (акт внедрения от 3.06.2009), кафедры аптечной и промышленной технологии лекарств Национального медицинского университета имени А.А.Богомольца (акт внедрения от 2.04.2009), курса технологии лекарств Тернопольского государственного медицинского университета им. И.Я.Горбачевского (акт внедрения от 30.11.2009), кафедры технологии лекарств, организации и экономики фармации Луганского государственного медицинского университета (акт внедрения от 16.10.2009),  кафедры технологии лекарств Запорожского государственного медицинского университета (акт внедрения от 3.05.2009)  и кафедры фармацевтической технологии и биофармации Национальной медицинской академии последипломного образования им. П.Л. Шупика (акт внедрения от 18.06.2009).

Личный вклад диссертанта. Автором лично:

  • рассмотрены современные литературные источники, касающиеся состояния заболевания атеросклерозом в Украине и за ее пределами, состояние фармацевтического рынка Украины гиполипидемических препаратов, применение синтетических и природных лекарств в терапии атеросклероза
  • обоснованы состав и разработана рациональная технология нового лекарственного средства в виде настойки на основе ЛРС для производства в аптечных и промышленных условиях;
  • изучены качественный состав и количественное содержание основных БАР настойки, проведены и установлены условия и срок хранения;
  • на основании проведенных экспериментальных исследований разработаны методики контроля качества и технологический промышленный регламент на производство настойки «Рависол»;
  • выполнено статистическую обработку и обобщены результаты экспериментальных исследований, сформулированы выводы.

В научных трудах, опубликованных с соавторами (Тихонов А.И., Шпичак О.С.), диссертантом изучены технологические свойства ЛРС (входит в состав настойки), обосновано и доказано экспериментальными исследованиями оптимальный состав и рациональную технологию настойки «Рависол», установлено качественный и количественный содержание основных БАР настойки, доказано стабильность настойки течение двух лет хранения.

Апробация результатов диссертации.Основные положения диссертационной работы изложены и обсуждены на: научно-практической конференции «Современные проблемы экстемпоральной рецептуры» (Харьков, 2007), Всеукраинском конгрессе «Настоящее и будущее фармации» (Харьков, 2008),
VIII Международной научно-практической конференции по участием международных специалистов «Клиническая фармация в Украине» (Харьков, 2008), научно-практической конференции, посвященной памяти доктора химических наук, профессора Павла Алексеевича Петюнина (к 95-летию со дня рождения) «Проблемы синтеза биологически активных веществ и создание на их основе лекарственных субстанций »(Харьков, 2009), юбилейной научно-практической конференции с международным участием, посвященной памяти кандидата фармацевтических наук, доцента Михаила Ивановича Борисова (к 80-летию со дня рождения)« Фармакогнозия XXI века. Достижения и перспективы »(Харьков, 2009), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием« Современные проблемы судебно-токсикологической науки и практики »(Харьков, 2009).

Публикации.По материалам диссертационной работы опубликовано
14 работ, в том числе 6 статей в научных специализированных журналах, 6 тезисов докладов, 1 информационное письмо, получен 1 патент.

Объем и структура диссертации.Диссертационная работа изложена на 145 страницах печатного текста и состоит из введения, 5 глав, общих выводов, списка использованных литературных источников и приложений. Работа иллюстрирована 10 рисунков и 32 таблицами. Список литературы содержит 138 источников, в том числе 60 иностранных авторов.

Основное содержание работы

Во введении диссертацииприведены актуальность темы, определена цель и основные задачи исследований, отмечена научная новизна и практическое значение полученных результатов, личный вклад соискателя.

В первой главе «Современное состояние применения лекарственного растительного сырья при атеросклерозе» обобщены данные современных литературных источников по проблеме заболевания атеросклерозом в Украине. Проанализированы номенклатуру лекарственных препаратов для лечения данной патологии, особенности фитотерапии, рассмотрены вопросы технологии производства настоек в промышленных условиях. В процессе информационного поиска мы пришли к обоснованному выводу, что эта патология является весьма распространенной и опасной, она требует новых препаратов для лечения, в частности на основе лекарственного растительного сырья в форме настойки, что обеспечит возможность длительного применения для профилактики и лечения атеросклероза, поэтому разработка нового отечественного препарата является актуальной.

Во втором разделе «Обоснование общей концепции и методов исследований.Объекты и методы исследований » обоснованно общую концепцию и методы исследований. При разработке состава и технологии настойки как основные компоненты применяли лекарственное растительное сырье: побеги и листья омелы белой, траву хвоща полевого, плоды софоры японской, семена каштана конского обыкновенного, плоды боярышника кроваво-красного, цветы клевера лугового, траву барвинка малого.

Как вспомогательные вещества были использованы: этанол 96% (ГФУ, дополнения 1. С. 339 - 343) и вода очищенная (ГФУ, дополнения 1. С. 308 - 309).

Приведены методы и методики, по которым проводились экспериментальные работы, а именно:

  • физические и физико-химические методы: содержание экстрактивных веществ, плотность, концентрация этанола, потенциометрическое определение рН, показатель преломления, удельная электропроводность;
  • технологические параметры: удельная масса, объемный вес, насыпная масса, пористость сырья, поризнисть слоя, свободный объем слоя;
  • качественные реакции на основные группы БАВ: флавоноиды, полифенольные соединения, катехины, сапонины;
  • хроматографические исследования на наличие в настойке «Рависол» рутину, кверцетина, кемпферол, кислоты урсоловой, эсцина; также проведен сравнительный анализ выхода флавоноидов в экстрагент в настойках с каждой растительного сырья, изготовленных отдельно, и в разработанном лекарственном средстве;
  • количественное определение суммы полифенольных соединений, суммы флавоноидов, содержание общего азота.

В третьей главе «Разработка состава и технологии настойки» приведены исследования по разработке состава и технологии лекарственного средства, полученного на основе ЛРС. Описанный технологический процесс производства в промышленных условиях.

В ходе разработки состава настойки «Рависол» нами была отобрана ЛРС, которая, по данным литературы, чаще всего применяется в народной и традиционной медицине для лечения этой болезни и может отвечать всем указанным выше направлениям фитотерапии при лечении атеросклероза.

Так, побеги и листья омелы белой содержат алкалоидоподибни вещества: вискотоксин, висцерин, ацетилхолин, холин, биологические амины, инозид, органические кислоты, витамин С, смолы, сапонины, сахар. Они снижают возбудимость ЦНС, обладают положительным инотропным и отрицательным батлотропним эффектами, расширяют сосуды и снижают артериальное давление.

Плоды софоры японской содержат рутин (12 — 17%), который обладает свойством снижать проницаемость и ломкость капилляров. Это лекарственное растительное сырье оказывает кровоостанавливающее, бактерицидное, противовоспалительное, гипотензивное действие.

Плоды боярышника является признанным средством лечения артериальной гипертензии, ишемической болезни сердца (ИБС), вегетососудистой дистонии (ВСД), тиреотоксикоза. Это обусловлено физиологически активными составляющими боярышника: флавоноидами, органическими кислотами, аминами, аскорбиновой кислотой, бетакаротина, витамином К, кумаринами и фенольными соединениями, комбинация которых способна снижать артериальное давление (АД), улучшать коронарное и мозговое кровообращение, повышать сократительные свойства миокарда.

Трава барвинка малого благодаря резерпиноподибним алкалоидам снижает частоту сердечных сокращений и АД, обладает седативным действием и улучшает мозговое кровообращение.

Семена каштана конского конского содержит смесь тритерпеновых сапонинов (альфа-эсцин, есцигенин, протоесцигенин, барингтогенолы С и D), благодаря чему оказывает противовоспалительное и антиэкссудативное действие, антикоагулянтный и антиагрегантный эффект, улучшает тонус вен и микроциркуляцию, ингибирует лизосомальные ферменты.

Цветки клевера лугового содержат каротин, витамины С, Е, группы В, эфирное масло, гликозиды, флавроны, органические кислоты, дубильные вещества, благодаря чему имеют антиатерогенными и антиоксидантными свойствами.

Трава хвоща полевого содержит кислоту кремниевую, горечи, смолы, сапонины, флавоноиды, витамин С, алкалоиды. Обладает мочегонным, антисептическим, общеукрепляющее действие, способствует нормализации водно-солевого обмена, выведению токсинов и шлаков. Эту ЛРС применяют при гипертонической болезни (ГБ), ИБС, атеросклерозе, сердечной недостаточности.

В связи с вышеизложенным мы пришли к обоснованному выводу о том, что такой состав физиологически активных веществ может оказывать положительный эффект на терапию атеросклероза лекарственного растительного сырья в форме настойки, которая может характеризоваться вышеприведенными фармакологическими свойствами.

При разработке комбинации с ЛРС мы исходили из того, чтобы в составе лекарственного средства был комплекс соединений, обеспечивающих весь спектр терапевтических эффектов (гиполипидемическое, антиатерогенного, антитромботический, антиоксидантный, гипотензивный, диуретический, седативный и другие), которые могут дать положительный результат лечебном использованию. Доля каждого растительного компонента и рациональность их сочетания определялись с учетом механизмов развития указанных видов патологии. Рекомендуемый состав содержит различные группы биологически активных веществ, совокупность которых, на наш взгляд, является адекватной сложном патогенеза заболевания и использования в таком сочетании обеспечивает выраженный конечный эффект. Проведенные фармакологические исследования установили, что сочетание растений в предложенном сборе не подавляет действие каждого растения, а комплексная лечебное действие растений расширяет терапевтические возможности лечения. Предварительным фармакологическими исследованиями лекарственного средства под условным названием «Рависол» установлено антиатерогенное, гиполипидемическое, умеренную гипотензивное, слабую кардиотоническое и диуретическое действия, замедление свертывания крови. Таким образом, на основании данных литературы и предварительных фармакологических исследований предложен состав настойки с последующим терапевтическим эффектом. Состав настойки запатентовано в Украине (№ 44193 от 25.09.2009 «Фармацевтическая, лечебно-профилактическая композиция на основе растительного сырья»).

В ходе эксперимента по выбору рациональных условий экстракции растительного сырья мы учитывали возможности предприятия и современное состояние химико-фармацевтического производства и остановились на изучении нижеприведенных условий, необходимых для получения настойки «Рависол»:

  • определить технологические параметры лекарственного растительного сырья;
  • установить необходимую концентрацию этанола для приготовления настойки;
  • определить оптимальное соотношение сырья и экстрагента;
  • обосновать проведении настаивания;
  • установить коэффициент поглощения этанола сырьем.

Для измельчения побегов и листьев омелы белой, травы хвоща полевого, цветков клевера лугового, травы барвинка малого (<7 мм) использовали измельчитель роторный (ИР 4-2) производства завода «спецтехоборудования»
(г. Харьков). Плоды софоры японской, семена каштана конского конского, плоды боярышника (<7 мм) измельчали на Микромельницы Молотков (8м2-М) производства завода «спецтехоборудования» (г. Харьков).

Экстрагирования биологически активных соединений из ЛРС — это сложный процесс, который зависит от многих условий и факторов.Известно, что выход экстрактивных веществ зависит от свойств ЛРС (содержание в сырье влаги, действующих и экстрактивных веществ и др.)., Способа экстрагирования и аппаратурного оснащения. Для повышения эффективности процесса экстрагирования и определения расходных норм сырья и экстрагента необходимо знать технологические свойства лекарственного сырья. Определены параметры приведены в табл. 1.

Обоснование условий экстракции вытяжки проводили за выходом экстрактивных веществ. По данным литературы известно, что флавоноиды являются наиболее активными биологически активными веществами, которые оказывают положительное влияние на лечение атеросклероза, поэтому в эксперименте по выбору концентрации этанола, времени настаивания и соотношение сырье: экстрагент вводили дополнительный показатель — содержание суммы флавоноидов .  С целью проведения экспериментальных исследований были приготовлены образцы настойки с таким содержанием ЛРС: побеги и листья омелы белой — 15,0, трава хвоща полевого — 10,0, плоды софоры японской — 15,0, семена каштана конского обыкновенного — 15,0, плоды боярышника кроваво-красного — 20 , 0, цветки клевера лугового — 10,0, трава барвинка малого — 15,0; в соотношениях 1: 5 и 1: 10 с использованием как экстрагента водно-спиртовой смеси с содержанием этанола
40%, 70% и 95%. Рассчитанную количество сырья помещали в стеклянную емкость с притертой пробкой, заливали рассчитанным количеством экстрагента и настаивали при периодическом встряхивании в течение 7 дней при комнатной температуре. По истечении указанного времени полученные вытяжки отстаивали в течение 48 часов при температуре (8 ± 2) о С, после чего их фильтровали через бязь с помощью вакуумного насоса. Каждые сутки проводили измерения по следующим показателям: содержание суммы флавоноидов, сухой остаток, удельная электропроводность, показатель преломления, рН, плотность, содержание этанола. Испытания проводили согласно методикам, изложенным в ГФУ 2001 и ГФУ 2004 г. (Дополнение 1) .

Для определения оптимальной концентрации этанола, соотношение сырье: экстрагент и времени настаивания сравнивали значение сухого остатка и содержания суммы флавоноидов в полученных образцах настойки. Данные эксперимента приведены в табл. 2 и 3.

В результате экспериментальных исследований было установлено, что повышение концентрации этанола приводит к уменьшению выхода экстрактивных веществ в образцах настойки, приготовленных в соотношениях 1: 5 так и в 1: 10, 40% этанол изымает наибольшее количество сухого остатка и общего содержания суммы флавоноидов в течение всего срока настаивания. Максимальное количество экстрактивных веществ (2,32 ± 0,02  %) при получении вытяжек методом мацерации экстрагируется 40% этанолом в соотношении

1: 10. Образец содержит 40% этанол в соотношении 1: 5, изымает несколько меньшее количество экстрактивных веществ (2,09 ± 0,01  %).Содержание суммы флавоноидов настойки в соотношении 1: 5 — 0,1280 ± 0,0064%, а 1: 10 — 0,1418 ± 0,0043% (табл. 2 и 3).

Учитывая динамику изъятия экстрактивных веществ (табл. 2 и 3), следует отметить, что оптимальным экстрагентом для получения настойки «Рависол» является этанол в концентрации 40%. Соотношение сырье: экстрагент — 1: 10, время настаивания 2 суток.

В ходе эксперимента также определялись:

  • удельная электропроводность — наблюдали незначительный рост в течение настаивания в своей группе;
  • показатель преломления — оставался почти неизменным в своей категории;
  • рН — наблюдали незначительное увеличение зависимости от времени настаивания;
  • плотность — в каждой экспериментальной группе показатель незначительно увеличивался в зависимости от времени настаивания;
  • содержание этанола — в своей группе испытаний оставался неизменным.

Для производства настойки при данных условиях установили коэффициент поглощения этанола 40%, который составляет 0,118 ± 0,003.

Все данные, полученные экспериментально, обобщенные, статистически обработаны и приведены в табл. 2 и 3.

На основе проведенных исследований была разработана технология настойки в условиях промышленного производства, составлена ее технологическая блок-схема, а также разработан технологический регламент, введенный в производство на ОАО «ХФЗ« Красная звезда », г. Харьков. Технологическая схема промышленного производства настойки «Рависол» приведена на рис., Из которой видно, что технологический процесс состоит из стадий вспомогательных работ, основного технологического процесса и упаковки готового продукта.

В четвертом разделе «Исследования качественного и количественного содержания биологически активных веществ настойки« Рависол » приведены результаты физико-химических исследований и разработки методик анализа настойки «Рависол», установлен срок хранения лекарственного средства.

Для разработки методов контроля качества и последующего внедрения настойки «Рависол» в производство необходимо было изучить его органолептические свойства, провести физико-химические исследования, проанализировать состав и определить количественное содержание БАВ.Проведенные исследования показали, что настойка содержит комплекс БАВ, состоящий из флавоноидов, дубильных веществ, сапонинов, катехинов (табл. 4).

Исходное сырье,
полупродукты, материалы

Этикетки, пачки, инструкция к медицинскому применению, коробки, групповые этикетки

Нерасфасованная
настойка из стадии 4

Время перемешивания, температура настойки при отстаивании, при освещении, физико-химические показатели

Упаковка настойки

Флаконы, пробки, крышки

Контроль в процессе
производства

Вес и размер частиц измельченного сырья

Количество ингредиентов, концентрация этанола, время перемешивания

Количество сырья и экстрагента для загрузки, время настаивания

ЛРС, входящий в состав настойки
«Рависол»

Вода очищенная, этанол 96%

Готовая продукция

Стадия 7

Маркировка, упаковка готовой продукции

(Стол для упаковки)

Стадия 6

Розливавання настойки «Рависол» во флаконы

(Автоматическая линия)

Стадия 4

Стандартизация и освещения               (аппарат для стандартизации, аппарат для освещения)

Часть 5

Мойки и сушки флаконов, пробок, крышек

(Моечно-сполоскувальна
машина)

Стадия 3

Настаивания

(Экстрактор)

Стадия 2

Приготовление экстрагента

(Этанол 40%)

(Реактор)

Получение настойки

Стадия 1

Измельчения ЛРС

(Измельчитель роторный,

Микромельницы молотковая)

Температура воды для мытья, чистота флаконов и пробок

Объем содержимого
упаковки

Правильность печати (№ серии, срок годности), количество пачек в коробке

Контроль готовой продукции

Рис. Технологическая схема производства настойки «Рависол» Также были проведены хроматографические испытания с помощью которыхустановлено наличие в настойке «Рависол» рутину, кверцетина, кемпферол, кислоты урсоловой, эсцина. Проведено сравнительный анализ флаваноидов лекарственного средства «Рависол» и настоек каждого растения, входящей в его состав, методом ТСХ .

Количественный анализ состоит из определения суммы флавоноидов (методом спектрофотометрии, ГФУ, 2.2.25, в пересчете на рутин), суммы полифенольных соединений (Титрометричний метод) и определения общего азота (ГФУ 1 издание, 2.5.9).

К методам контроля качества настойки нами были включены разделы: описание, плотность, сухой остаток, содержание этанола, тяжелые металлы, объем содержимого упаковки, идентификация на полифенольные соединения, флавоноиды, катехины, сапонины, хроматографические испытания на кверцетин, кемпферол, кислоту урсоловую, эсцин, количественное определение суммы флавоноидов, суммы полифенольных соединений, содержание общего азота и исследования на микробиологическую чистоту.

С целью определения стабильности настойку «Рависол» был заложен на хранение при комнатной температуре в течение 2 лет 3 мес.
во флаконах из темного стекла, закупоренных пробкой и затянуты крышкой.

Установлено, что на протяжении периода наблюдения настойка отвечала требованиям ГФУ по всем показателям качества. Колебания количественного содержания действующих веществ происходило в пределах погрешности спектрофотометрического метода.

Таким образом, на основании экспериментальных данных установлено, что при хранении настойки в темном месте при комнатной температуре срок годности составляет 2 года.

В пятом разделе «Доклинические, фармакологические и микробиологические исследования настойки« Рависол »приведены доклинические фармакологические исследования, которые проводились на базе ЦНИЛ под руководством профессора Яковлевой Л.В. и Харьковском государственном медицинском университете под руководством профессора Звягинцевой Т.В.

В ходе исследований была доказана антиатерогенное, гиполипидемическое, умеренная гипотензивное, слабая кардиотоническое и диуретическое действия, замедление свертывания крови , что в целом положительно влияет на сердечно-сосудистую систему.

Микробиологические испытания проводили в соответствии с требованиями ГФУ, дополнения 1 (разделы 2.6.12., 2.6.13., N), категория ПО (раздел 5.1.4., N). Работа выполнена в отделе контроля качества ОАО «ХФЗ« Красная звезда »,
(г. Харьков) под руководством зав. лаборатории Бантюкова С.В.

В настойке допускается общее число жизнеспособных аэробных микроорганизмов: не более 103 бактерий и не более 102 грибов в 1 мл.

Не допускается наличие бактерий семейства Enterobactenaceae в 1 мл.

Не допускается наличие Staphylococcus aureus в 1 мл.

Не допускается наличие Pseudomonas aeruginosa в 1 мл.

Проведенные исследования показали, что по степени микробной загрязненности настойка «Рависол» соответствует требованиям ГФУ по этому основанию.

Таблица 4

Качественные реакции на основные группы биологически активных веществ
настойки «Рависол»

Сапонины

Реактив

Вода,
встряхивание

10% раствор свинца ацетата

10% раствор меди сульфата, кислота серная конц.

Наблюдения

Стойкая пена

помутнение раствора

коричнево-зеленый цвет

Реактив

Хлороформ, к-та серная конц.

Трубы III хлорид

0,5% этанол. раствор ванилина,
к-та серная конц.

Наблюдения

Оранжевый цвет органического слоя

Белый амор-фний осадок

Желтая окраска

Флавоноиды

Реактив

Раствор алюминия хлорида в 96% этаноле

10% р-н натрия гидроксида

2% р-н к-ты борной,
2% р-н спиртовой
к-ты лимонной

Наблюдения

Желто-зеленая флуоресценция в УФ-свете
при 365 нм

Желтый цвет становится более насыщенным

Ярко-желтую окраску

Реактив

1% р-н ванилина в кислоте хлористоводородной конц.

Наблюдения

Ярко-зеленую окраску

Полифенольные соединения

Реактив

Зализоамониеви квасцы (ЗАГ)

1% спиртовой р-н железа III хлорида

1. 10% к-та уксусная из свинца ацетатом;

2. ЗАГ

Наблюдения

Коричнево-зеленую окраску

Темнозеленый окраски с коричневым оттенком

1. Выпадает коричневый осадок,

2. Темно-коричневую окраску

Катехины

Реактив

Реактив Шталя

Наблюдения

Красно-малиновую окраску

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

  1. Впервые научно и экспериментально обоснованы состав и технологию жидкой лекарственной формы в виде настойки для лечения и профилактики атеросклероза, содержащей вытяжки из: побегов и листьев омелы белой — 15,0, травы хвоща полевого — 10,0, плодов софоры японской — 15,0 , семян каштана конского конского — 15,0, плодов боярышника — 20,0, цветков клевера лугового — 10,0, травы барвинка малого — 15,0, этанола 40% до одного литра.
  2. Экспериментальными данными установлены рациональные условия экстрагирования биологически активных веществ настойки «Рависол»: экстрагент — 40% этанол, соотношение сырье: экстрагент — 1: 10, время настаивания — 2 суток.
  3. На основании проведенных исследований разработана технология настойки «Рависол», методики контроля качества и промышленный технологический регламент для производства препарата в условиях ОАО «ХФЗ« Красная звезда »(г. Харьков).
  4. Установлено наличие в настойке «Рависол» флавоноидов (рутина, кверцетина, кемпферол), полифенольных соединений, катехинов, сапонинов и эсцина, кислоты урсоловой.
  5. Разработан и внедрен методики количественного определения суммы флавоноидов (не менее 0,10% в пересчете на рутин) и суммы полифенольных соединений (не менее 0,10% в пересчете на танин).
  6. Изучены стабильность разработанной настойки «Рависол» при хранении в течение 27 месяцев во флаконах из темного стекла при комнатной температуре в защищенном от света месте и установлены срок годности, который составляет 2 года.
  7. Фармакологическими исследованиями доказано антиатерогенное, гиполипидемическое, умеренную гипотензивное, слабую кардиотоническое и диуретическое действия, замедление свертывания крови.
  8. Микробиологические исследования показали, что разработанная настойка по уровню микробной контаминации соответствует требованиям ГФУ на препараты для внутреннего применения.
  9. Разработан и внедрен технологический регламент и методы контроля качества (АНД) в промышленное производство, настойка «Рависол» выпускается на ОАО «ХФЗ« Красная Звезда », г. Харьков (приказ МЗ Украины № 379 от 02.06.09; регистрационное удостоверение
    № UA/9617 / 01/01).
  10. Разработан и внедрен информационное письмо «Методика определения суммы флаваноидов в настойках с ЛРС в условиях аптек» № 255 — 2009 р.
  11. Новизна исследований защищена патентом Украины «Фармацевтическая, лечебно-профилактическая композиция на основе растительного сырья»,
    (№ 44193 от 25.09.2009), Бюл. № 18.
  12. Фрагменты исследований внедрены в учебный процесс ряда высших учебных заведений Украины.

Список опубликованных работ по теме диссертации

  1. Тихонов А.И. Теоретическое обоснование создания лекарственного препарата антисклеротическое действия / А.И. Тихонов, С.И. Трутаев / / Лекарства Украины. - 2007. - № 112 (приложение). - С. 108-110. ( Личный вклад: анализ данных по проблеме заболевания атеросклерозом и применения лекарственного растительного сырья в терапии указанной патологии, оформления статьи ).
  2. Тихонов А.И. Определение технологических параметров лекарственного растительного сырья, входящего в состав сложной настойки «Рависол» /
    А.И. Тихонов, С.И. Трутаев, А.С. Шпичак / / Вестник фармации. - 2008. - № 4 (56). - С. 39-45. ( Личный вклад: изготовление образцов, планирования и проведения эксперимента, статистическая обработка результатов, оформление статьи) .
  3. Трутаев С.И. Разработка состава настойки «Рависол» для фармакотерапии атеросклероза / С.И. Трутаев, А.И. Тихонов, А.С. Шпичак / / Вестник фармации. - 2009. - № 1 (57). - С. 23-26. ( Личный вклад: изготовление образцов, планирования, проведения экспериментальных исследований, статистическая обработка результатов, оформление статьи) .
  4. Тихонов А.И. Физико-химические исследования сложной настойки «Рависол» / А.И. Тихонов, С.И. Трутаев, А.С. Шпичак / / Вестник фармации.- 2008. - № 3 (55). - С. 23-26. ( Личный вклад: изготовление образцов, проведение физико-химических исследований, статистическая обработка результатов, оформление статьи) .
  5. Тихонов А.И. Разработка технологии настойки «Рависол» и исследования показателей качества в процессе хранения / А.И. Тихонов, С.И.Трутаев / / Вестник фармации. - 2009. - № 2 (58). - С. 35-39. ( Личный вклад: изготовление образцов, планирования и проведения эксперимента, статистическая обработка результатов, оформление статьи) .
  6. Трутаев С. И. Изучение фармакологической активности настойки «Рависол» для фармакотерапии атеросклероза / С.И. Трутаев / / Сборник научных трудов сотрудников НМАПО им. П.Л. Шупика. - 2009. - Вып. 18 (3). - С. 623-630. ( Личный вклад: изготовление образцов, анализ результатов, оформление статьи) .
  7. Пат. 44193 UA, МПК (2009), А61К 36/00 А61Р 35/00. Фармацевтическая, лечебно-профилактическая композиция на основе растительного сырья / А.И. Тихонов, С.И. Трутаев, И.В. Трутаев / / u 2009 03174; заявл. 03.04.2009; опубл. 25.09.2009, Бюл. № 18. - 20 с. ( личный вклад: проведение экспериментальной части, оформление материала).
  8. Методика определения суммы флавоноидов в настойках из лекарственного растительного сырья в условиях аптек: информационное письмо № 255 /
    А.И. Тихонов, С.И. Трутаев. - М.: Укрмедпатентинформ, 2009. - 4 с. ( Личный вклад: изготовление образцов, проведение экспериментальной части, оформление материала).
  1. Трутаев С.И. Лекарственные растения — перспективный источник создания экстемпоральной рецептуры аптек / С.И. Трутаев, А.И. Тихонов / / Современные проблемы экстемпоральной рецептуры: материалы научно-практической. конф., 27-28 сент. 2007 г. — М.: Изд-во НФаУ, 2007. - С. 46-50 .
  2. Трутаев С.И. Влияние настойки «Рависол» на уровень артериального давления интактных животных / С.И. Трутаев, А.И. Тихонов, А.С. Шпичак / / Настоящее и будущее фармации: тезисов. доп. Всеукр. конгр., 16-19 апр.
    2008 г. — М.: Изд-во НФаУ, 2008. - С. 230.
  3. Тихонов А.И. Количественное определение полифенольных соединений сложной настойки «Рависол» / А.И. Тихонов, С.И. Трутаев, А.С.Шпичак / / Клиническая фармация в Украине: материалы VIII Всеукр. научно-практической. конф. с участием международных специалистов, 6-7 июня. 2008 г. — М.: Изд-во НФаУ, 2008. - С. 98.
  4. Трутаев С.И. Количественное определение суммы флавоноидов фитопрепарата «Рависол» / С.И. Трутаев, А.И. Тихонов, А.С. Шпичак / / Проблемы синтеза биологически активных веществ и создания на их основе лекарственных субстанций: материалы научно-практической.конф., посвященной памяти доктора химических наук, проф. Павла Алексеевича Петюнина (к 95-летию со дня рождения), 26 февраля 2009 г. — М.: Изд-во НФаУ, 2009. - С. 128.
  5. Трутаев С.И. Изучение физико-химических свойств и условий хранения настойки «Рависол» для лечения атеросклероза / С.И. Трутаев, А.И.Тихонов, А.С. Шпичак / / Фармакогнозия XXI века. Достижения и перспективы: тезисы доп. юбилейной науч.-прак. конф. с международным участием, посвященной памяти кандидата фармацевтических наук, доцента Михаила Ивановича Борисова (к 80-летию со дня рождения),
    26 марта 2009 — М.: Изд-во НФаУ, 2009. - С. 230-231.
  6. Трутаев С.И. Определение содержания общего азота сложной настойки «Рависол» / С.И. Трутаев, А.И. Тихонов, А.С. Шпичак / / Современные проблемы судебно-токсикологической науки и практики: материалы Всеукр. науч.-прак. конф. с международным участием, 9-10 апр. 2009 г. — М.: Изд-во НФаУ, 2009. - С. 64-65.
Дополнительные статьи из рубрики "Технология лекарств и организация фармацевтического дела"

MAXCACHE: 0.56MB/0.02899 sec